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| ＜試料の分解＞ |
分解の模式図 |
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試料に 濃Ｈ２ＳＯ４を加えて加熱すると、 分解と同時に酸化還元反応がおこり、たんぱく質などに含まれる窒素は ＮＨ３に変り （ＮＨ４）２ＳＯ４の 形となる。 |
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（1） |
Ｈ２ＳＯ４は 有機物を脱水してこれを炭化する。 |
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（2） |
この炭素は、 Ｈ２ＳＯ４を還元して ＳＯ２にし、 自らはＣＯ２となる。 |
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（3） |
有機物の分解炭化にあたって生成する水素は ＮＨ３の生成を促進する。 |
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（4） |
ＮＨ３は 直ちにＨ２ＳＯ４と化合し、 （ＮＨ４）２ ＳＯ４となる。 |
| ＜ＮＨ３の蒸留＞ |
蒸留の模式図 |
| ・ |
反応液を水で希釈、過剰のＮａＯＨを加えて加熱すると、 ＮＨ３が留出する。
（ＮＨ４）２ＳＯ４ ＋２ＮａＯＨ → Ｎａ２ＳＯ４ ＋２ＮＨ３↑ ＋２Ｈ２Ｏ
この留出したＮＨ３を一定量の Ｈ２ＳＯ４溶液に 吸収させる。 |
| ＜逆滴定＞ |
逆滴定の模式図 |
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この留出ＮＨ３を吸収させた Ｈ２ＳＯ４溶液を、 ＮａＯＨ標準溶液で滴定する。
→滴下量Ａ(ml)
空試験として吸収させていない元の Ｈ２ＳＯ４溶液を、 ＮａＯＨ標準溶液で滴定する。
→滴下量Ｂ(ml)
空試験の滴下量と本試験の滴下量の差（Ｂ−Ａ）が、留出した ＮＨ３に相当する ＮａＯＨの量となる。 |
| ＜窒素量の計算＞ |
窒素量の計算 |
| ・ |
滴下量の差（Ｂ−Ａ） １ml あたりは、０.００１４ｇ の窒素に相当する。 |
| ＜粗タンパク質量の計算＞ |
窒素係数 |
| ・ |
たんぱく質中の窒素含量は、たんぱく質の種類により多少異なるが、平均的に１６％ほどとされている。 したがってＮ量からたんぱく質量に換算するには、その逆数である ６.２５ をかけて求める。
※ この数値 ６.２５ を 窒素係数 と呼ぶ。 |
